一、NUS開(kāi)發(fā)出檢驗(yàn)免疫細(xì)胞能力的新測(cè)法

　　新加坡國(guó)立大學(xué)(NUS)健康創(chuàng)新與技術(shù)研究所的助理教授Cheow Lih Feng與他的團(tuán)隊(duì)成員Luah Yen Hoon博士和Wu Tongjin博士一起設(shè)計(jì)了一種簡(jiǎn)單而創(chuàng)新的方法來(lái)直接識(shí)別和分類(lèi)參與細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性的免疫細(xì)胞。

　　“我的團(tuán)隊(duì)提出的新方法在識(shí)別能夠有效消除目標(biāo)細(xì)胞的殺傷細(xì)胞方面具有高度選擇性。這與其他細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性表征技術(shù)形成鮮明對(duì)比，后者是勞動(dòng)密集型的，耗時(shí)且選擇性較低，”來(lái)自新加坡國(guó)立大學(xué)設(shè)計(jì)與工程學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程系的助理教授Cheow說(shuō)。

　　這種新方法發(fā)表在2023年8月31日的《自然生物醫(yī)學(xué)工程》雜志上。

　　操作流程：

　　1、將殺傷細(xì)胞涂成綠色

　　在細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性過(guò)程中，一些免疫細(xì)胞可以通過(guò)細(xì)胞裂解釋放蛋白質(zhì)來(lái)破壞外來(lái)細(xì)胞，從而觸發(fā)一系列破壞外來(lái)細(xì)胞的細(xì)胞過(guò)程。這些表現(xiàn)出細(xì)胞殺傷行為的免疫細(xì)胞被稱(chēng)為殺傷細(xì)胞。一旦這些外來(lái)細(xì)胞被殺死或溶解，它們會(huì)將細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)容物泄漏到周?chē)鷧^(qū)域。

　　在這個(gè)概念的基礎(chǔ)上，NUS團(tuán)隊(duì)提出了一種方法，可以在負(fù)責(zé)摧毀這些外來(lái)細(xì)胞的殺傷細(xì)胞表面“涂上”顏料。研究人員將這種新方法命名為PAINTKiller(即“殺傷細(xì)胞的近距離親和力細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移鑒定”)。

　　新加坡國(guó)立大學(xué)的研究人員使用一種被稱(chēng)為羧基熒光素琥珀酰酯(CFSE)的細(xì)胞內(nèi)染色染料來(lái)染色外來(lái)細(xì)胞。這種無(wú)毒染料可以進(jìn)入細(xì)胞并留在細(xì)胞內(nèi)。然后，研究小組對(duì)免疫細(xì)胞的表面進(jìn)行了修飾，以便在細(xì)胞裂解過(guò)程中，當(dāng)外源細(xì)胞釋放CFSE染料時(shí)，這種受體能夠捕獲CFSE染料，從而使他們能夠識(shí)別出負(fù)責(zé)的殺傷細(xì)胞。

　　2、為免疫治療應(yīng)用分類(lèi)殺傷細(xì)胞

　　繼PAINTKiller方法的成功設(shè)計(jì)之后，Cheow助理教授和他的團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，以研究使用PAINTKiller對(duì)參與細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性的殺傷細(xì)胞亞型進(jìn)行分類(lèi)的可能性。研究小組證明，與未標(biāo)記的殺傷細(xì)胞相比，用CFSE染料標(biāo)記的殺傷細(xì)胞在殺死外來(lái)細(xì)胞方面表現(xiàn)出更好的性能。

　　使用CFSE染料作為標(biāo)識(shí)符，NUS的研究人員能夠?qū)?xì)胞的亞型進(jìn)行分類(lèi)和提取，并將它們分開(kāi)培養(yǎng)。他們還發(fā)現(xiàn)，使用PAINTKiller方法用CFSE標(biāo)記的免疫細(xì)胞具有更好的殺傷能力，即使在12天后仍然有效。

　　這些有希望的結(jié)果表明，PAINTKiller可以為生產(chǎn)更高質(zhì)量的基于細(xì)胞的免疫療法提供潛在的策略。

　　3、擴(kuò)大PAINTKiller在分析細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性中的應(yīng)用

　　為了證明PAINTKiller的靈活性，NUS研究人員將其與一種稱(chēng)為細(xì)胞因子分泌法(CSA)的方法結(jié)合起來(lái)，該方法測(cè)量免疫細(xì)胞在免疫反應(yīng)期間釋放的稱(chēng)為細(xì)胞因子的蛋白質(zhì)。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中，研究小組同時(shí)在殺傷細(xì)胞表面標(biāo)記了可以捕獲CFSE和細(xì)胞因子的受體，這些受體是重要的細(xì)胞信號(hào)蛋白。

　　本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，PAINTKiller是一種強(qiáng)大的工具，能夠以高通量的方式全面靈活地檢測(cè)細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性、蛋白質(zhì)分泌和單個(gè)殺傷細(xì)胞的表面受體。

　　考慮到在細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性過(guò)程中起作用的各種機(jī)制的復(fù)雜性，一個(gè)能夠測(cè)量細(xì)胞毒性能力、概述免疫細(xì)胞和蛋白質(zhì)特征以及分析基因表達(dá)的多模式、高通量單細(xì)胞系統(tǒng)將有助于準(zhǔn)確研究細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性。

　　為此，NUS團(tuán)隊(duì)突破了PAINTKiller方法的界限，開(kāi)發(fā)了單細(xì)胞PAINTKiller-seq測(cè)定法，這是一種單細(xì)胞測(cè)序工作流程，集成了轉(zhuǎn)錄組分析、表型分析和遺傳分析的數(shù)據(jù)。

　　NUS研究小組正在努力擴(kuò)大PAINTkiller方法的多功能性，通過(guò)在不同的殺傷細(xì)胞和外來(lái)細(xì)胞組合上進(jìn)行測(cè)試，以揭示免疫反應(yīng)復(fù)雜性背后的生物學(xué)原理，并將其開(kāi)發(fā)為研究和臨床應(yīng)用的不可或缺的工具。

　　二、NUS大學(xué)介紹

　　NUS是環(huán)太平洋大學(xué)聯(lián)盟、亞洲大學(xué)聯(lián)盟、亞太國(guó)際教育協(xié)會(huì)、國(guó)際研究型大學(xué)聯(lián)盟、新工科教育國(guó)際聯(lián)盟、國(guó)際應(yīng)用科技開(kāi)發(fā)協(xié)作網(wǎng)等高校聯(lián)盟的成員，也是AACSB (Association to Advance Collegiate Schools of Business) 和EQUIS (European Quality Improvement System) 的認(rèn)證成員。

　　學(xué)校建校一百多年來(lái)，涌現(xiàn)出了無(wú)數(shù)杰出校友，在政治領(lǐng)域尤其突出。如新加坡第二任總理吳作棟、新加坡第二任總統(tǒng)本杰明?亨利?薛爾思、新加坡第七任總統(tǒng)陳慶炎、馬來(lái)西亞第二任總理阿卜杜勒?拉扎克、馬來(lái)西亞第四任總理馬哈蒂爾?穆罕默德和新加坡總理李顯龍的夫人何晶等。

　　NUS排名一直在亞洲乃至世界的前列：

　　2024年QS世界排名第8位

　　2024年QS亞洲排名第3位

　　2024年泰晤士高等教育世界大學(xué)排名第29位

　　2023年泰晤士高等教育世界亞洲排名第3位

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